Western快速封閉液
Rapid Blocking Buffer for
WB
● 產品組成：
|
貨號
|
名稱
|
規(guī)格
|
保存條件
|
|
WR5020-100ml
|
Western快速封閉液
|
100 ml
|
2-8℃
|
|
WR5020-500ml
|
Western快速封閉液
|
500 ml
|
2-8℃
|
|
|
說明書
|
一份
|
|
● 產品簡介：
本產品專為快速高效封閉Western Blot 轉印膜而設計，避免抗體與封閉劑的非特異結合，最大程度地降低了背景。同時，本封閉劑無內源的磷酸化蛋白及生物素，對磷酸化特異抗體及生物素檢測也不會產生干擾。本封閉劑不與蛋白產生非特異性結合，因而只封閉膜而不會屏蔽樣品蛋白的抗體識別位點，大大提高了抗體檢測靈敏度。實驗表明，本封閉劑對許多抗體都有不同程度的信號增強作用。然而這種信號增強作用因抗體而異，對某一特定抗體，并不一定具有確定的信號增強作用。
注意： 沒有任何一種封閉劑能適合所有抗原和抗體的檢測系統(tǒng)。如出現本試劑不適合的抗體，請?zhí)鎿Q使用其它種類的封閉劑如BSA或脫脂奶粉等。
● 貯存、效期及運輸：
2-8℃貯存，有效期一年，常溫運輸。
● 注意事項：
1. 快速高效：5-10 min內完成封閉；只結合封閉轉印膜而不結合蛋白，因此不會屏蔽樣品蛋白的抗體識別位點，與傳統(tǒng)的脫脂奶粉和BSA 封閉相比信噪比更高；
2. 方便快捷：無需稀釋，即取即用；
3. 性能可靠：與抗體無交叉反應；
4. 應用范圍廣：無磷酸化蛋白，無生物素，尤其適合磷酸化特異抗體及生物素檢測系統(tǒng)；
5. 節(jié)省抗體：使用本封閉劑后，所需的最適抗體濃度低于常規(guī)使用濃度，可大大節(jié)省抗體使用量。
6. 與PVDF膜相比，NC膜需要更長時間的封閉。
● 使用說明：
1. 本產品無需稀釋，開蓋即用。
2. 完成轉膜后，使用TBST漂洗轉印膜3次，每次5分鐘；
3. 將轉印膜放入到雜交孵育盒中，加入10-20 ml快速封閉液完全覆蓋轉印膜，置于搖床輕輕搖動，參考下表確定封閉時間：
|
膜類型
|
推薦封閉時間
|
反應溫度
|
|
PVDF膜
|
5-10分鐘
|
常溫 25度
|
|
NC膜
|
10-20 分鐘
|
常溫25度
|
注意：使用本產品，PVDF膜和NC膜使用推薦封閉時間，經多種抗體的測試封閉效果顯著優(yōu)于常規(guī)的BSA封閉1 h。對于一些背景非常高的抗體，可以嘗試延長封閉時間。如有特殊需要，也可4℃封閉過夜。
4. 封閉結束后棄去封閉液，進行Western Blot后續(xù)操作。